使用MIRA技术结合CRISPR-Cas12a对13种高危人乳头瘤病毒(HR-HPV)检测开发了简单快速诊断方法-比色读数与横向流动TESTOR,在《Bioactive Materials》期刊做了“An enhanced method for nucleic acid detection with CRISPR-Cas12a using phosphorothioate modified primers and optimized gold-nanopaticle strip”文章发表,影响因子16.874。
用磷酸修饰引物,设计crRNA,当37℃反应条件中,MIRA与Cas12a组分在同一反应体系内,首先启动MIRA扩增,扩增后的靶序列随后被Cas12a-crRNA进行识别。crRNA与靶点结合激活Cas12a的内切酶活性,并开始切割附近的报告探针,释放荧光信号。
通过这些创新,将扩增和检测集成到一个单一的反应系统中,封闭环境中完成检测,避免了脱盖容易导致的假阳性和气溶胶风险,同时可对此开发便携式检测盒。
(TESTOR工作流程示意图)
(检测13种HR-HPVs)
并且实验中使用了HPV16和HPV18的临床样本验证了该方法的检测性能,TESTOR检测与qPCR检测的阳性和阴性一致性均为100%。
(临床样本检测)
TESTOR检测能够在不同的环境中进行测试,如机场、诊所、当地社区和其他地点。
(上述信息均来源于文章:
https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S2452199X21002255)点击底部阅读原文,即可查阅原文
(实时荧光定量检测HPV)
https://www.nature.com/articles/s41598-021-92329-2)点击底部阅读原文,即可查阅原文