TwistDx 公司于2018年新推出了一系列液态 RPA 试剂盒,是高通量实验室的理想之选,也非常适合希望以灵活的 RPA 试验体系进行实验的研究员使用。
TwistAmp Liquid 试剂盒提供经甘油稳定化处理的液态 RPA 试剂,该形态对于在实验室执行 PCR 和其他基于酶的反应的任何人来说都非常熟悉。这些试剂各自装于单独的试管中,用户可随意从中移取任何量的酶混合液来构建自己所选的 RPA 反应体积,配制用于多次反应的预混液,或者以各种 RPA 组分比例进行实验以优化试验。
除了具有室温稳定性的冻干态 TwistAmp RPA 试剂盒这一旗舰产品,新推出的 TwistAmp Liquid 试剂盒还提供另一种形态的试剂让您选择,该试剂盒是现场或定点试验开发的理想之选。液体形态让实验室更容易地在日常工作中使用快速简单的 RPA 法(该方法有时甚至采用与 PCR 相同的引物)取代 PCR 法,以及更容易地开发出定制的试验。
新推出的 TwistAmp Liquid 系列包括 TwistAmp Liquid Basic和TwistAmp Liquid exo (RT系列于2018年停产)。
产品组成:
TwistAmp Basic Kit(冻干态) | TwistAmp Basic Kit(液态) NEW!!! |
●96 freeze-dried RPA pellets
●4 x 1 ml TwistAmp? Rehydration buffer ●1 x 250?l?magnesium acetate (280mM) ●6ul of Control template ●45ul of Control primer mix |
●50ul 20x Core Reaction Mix
●3ml 2 x Reaction Buffer ●500ul 280mM MgOAc ●550ul 10 x E-mix ●100ul of Positive control template ●45ul of Positive control oligo mix
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产品信息:
货号 | 品名 | 规格 |
TALQBAS01 | TwistAmp Liquid Basic Kit | 100 rxn以上 |
TALQBASRT01 | TwistAmp Liquid Basic RT Kit | 100 rxn以上(停产) |
TALQEXO01 | TwistAmp Liquid Exo Kit | 100 rxn以上 |
TALQEXORT01 | TwistAmp Liquid Exo RT Kit | 100 rxn以上(停产) |
附: TwistAmp liquid试剂盒Q&A
Q 20x核心反应mix有沉淀,是否影响其功能?
A在低温保存时, 重组酶和辅助蛋白在50%甘油中20x核心反应mix中有时会发生可逆的共沉淀反应.所以在室温融化混匀后离心使其返回溶液形式并不影响其功能。
Q 使用Liquid试剂盒做多重实验,能否制备master mix?
A 可以。Oligos, 2x Reaction Buffer, water, dNTPs and 10x E-mix可以预先混合,置于冰上几个小时,在很多实例中可以过夜保存(性能上有任何改变都需要客户自行实验和评价)。一旦加入20x核心酶,短期保存在冰上也是可以的。
Q 使用Liquid试剂盒如何提高重复率和RNA模板的扩增率?
A 先将RNA模板和醋酸镁混合后加入反应体系中,RNA的三级结构会抑制逆转录酶的活性,所以加入RNA和醋酸镁时,将两者分别加到在管内壁两侧或者将醋酸酶加在管内盖中,同时离心混入体系,这种操作会提高反应性能。
Q 在TwistAmp Liquid E-mix中有沉淀,还能使用吗?
A 可以。少量磷酸肌酸会发生沉淀不会影响RPA反应,只需在实验前通过涡旋将沉淀重悬离心即可。
Q 在使用Liquid试剂盒时,是否能够使用dUTP/生物素(酰)化dUTP?
A 可以,请参考
http://dx.doi.org/10.7150/thno.15250和http://dx.doi.org/10.1186/s13148-015-0100-6
Q 最小的RPA液体反应体系是多少?
A 最小低至PL级,请参考
http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0153359
Q 液体反应体系中需要加入多少dNTPs?
A 1.8mM(总)dNTPs 作为起始量即可。用户也可以根据自身实验优化浓度,有时1-12mM均适用。
Q 如何提高扩增曲线的可重复性?
A 优化扩增曲线考虑以下因素: 对于低拷贝数模板,不稳定扩增可能是因为达到检测限或者是反应混匀程度不同(未混匀的反应扩增效率不佳)。另外,在低温情况下存贮,重组酶和辅助蛋白在50%甘油情况下形成沉淀,也是可能导致不稳定扩增的原因。所以,20x核心反应mix在室温下解冻并震荡涡旋将使其成为液体,不影响其功能,并且有效提高扩增效率。不稳定扩增也可能是因为master mix量不足,在加入体系前,用户必须保证震荡后20x核心反应组分均一。
TwistDx公司试剂盒产品系列
货号 | 试剂盒名称 | 描述 |
TABAS03kit | TwistAmp Basic Kit | 用于RPA快速扩增,检测DNA |
TABSRT01KIT | TwistAmp Basic RT Kit | 用于逆转录扩增,检测RNA(停产) |
TAEXO02kit_T | TwistAmp exo Kit | 用于实时荧光探针检测DNA |
TAEXORT02kit_T | TwistAmp exo RT Kit | 用于实时荧光探针检测RNA(停产) |
TANFO02_T | TwistAmp nfo Kit | 用于末端检测,检测DNA复制反应 |
TAFPG01kit_T | TwistAmp fpg Kit | 用于real-time探针检测(停产) |
TALQBAS01 | TwistAmp Liquid Basic Kit | 用于RPA快速扩增,检测DNA |
TALQBASRT01 | TwistAmp Liquid Basic RT Kit | 用于逆转录扩增,检测RNA(停产) |
TALQBASRT01 | TwistAmp Liquid Exo Kit | 用于实时荧光探针检测DNA |
TALQEXORT01 | TwistAmp Liquid Exo RT Kit | 用于实时荧光探针检测RNA(停产) |
TAUST01kit | TwistAmp exo +Listeriam Kit | 用于李斯特菌检测 |
TAEXOCAMP01KIT | TwistAmp exo +Campylobacter Kit | 用于弯曲菌检测(停产) |
TFSAL01KIT_T | TwistFlow Salmonella Kit | 用于沙门螺杆菌检测(停产) |
TGSAL01KIT_T | TwistGlow Salmonella Kit | 用于沙门螺杆菌检测(停产) |
TFRED01KIT_T | TwistFlow RedSnapper Kit | 用于红鲷鱼基因检测(停产) |
北京立博泰业科技有限公司与英国TwistDx公司多年合作,致力于RPA技术及相关产品在中国大陆地区的推广,咨询热线:13911291885,QQ:2208618493,Email:2208618493@qq.com,欢迎来电或者线上垂询!